乙型肝炎病毒标志物常用检测方法 [复制链接]

来源：肝胆相照平台

作者：韩大康

目前乙肝五项的检测方法有三大类，一类是定性检测，另外两类是半定量检测和定量检测。

定性检测有国产乙肝金标法或者采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法。定性检测的结果就是告诉个体体内有没有乙肝表面抗原、乙肝表面抗体等指标。这种方法简单、快速、成本较低。但这种方法不够精确灵敏，不能定量，特别是低浓度的标本，有时会漏诊，因为没有数值也就不能动态观察疗效、评价治疗效果。因此目前临床已经不常用，主要用于体检筛查等。对于乙肝患者来讲，尽量还是用半定量和定量的检测方法。因为其结果能较为清楚地反应疾病的变化过程，为判断预后提供依据。

半定量和定量的检测方法就是我们常看到化验单上标注的微粒化学发光法、电化学发光法等。酶联免疫吸附法-ELISA法也可以进行半定量的检测。采用半定量检测的化验单上的单位是COI或者S/CO，它是一个数值。主要原理就是将测得光密度结果（OD值）与一个临界值（CUTOFF值）对比，比值越高代表乙肝表面抗原或者乙肝表面抗体等越高。它在一定范围内可比性比较好，它比定性的检测方法灵敏性、准确性都要好，但这个比值结果不是精确的数字，也不是线性关系，因此叫半定量，可以大致反应抗原抗体的水平。

目前应用比较多的是定量检测方法，其灵敏度、特异性最好，主要针对乙肝表面抗原和抗体。例如HBsAg用的单位就是IU/ml。常见正常参考值是0.05IU/ml。定量检测的结果相对比较稳定，因此定量检测有很好的可比性。采用的试剂主要是进口的为主，不同厂家的试剂检测范围有所不同。检测过程通过仪器设备完成，其自动化程度很高，可以对标本自动稀释，减少人为误差。不过由于试剂的不同、批次不同，定标也不同，小范围的波动意义不大，就是说如果化验值稍微高一点，患者也不必纠结担心。另外检测结果的COI值和定量结果之间没有稳定的换算关系。

定量检测可以很好地反应乙肝患者体内病*的变化，以及抗病*治疗的效果，还能预测远期疗效。例如HBsAg水平越低反应体内的cccDNA、HBVDNA水平都比较低，抗病*治疗中HBsAg水平下降越快，提示远期预后好。根据HBsAg的变化，也可以预测HBeAg血清转换率。因此定量检测的方法，特别是在接受核苷酸类似物和干扰素抗病*治疗的患者中应用的越来越多。

HBsAg的定量检测可以反映HBVDNA的水平，但它还不能代替HBVDNA的检测。临床上也可以对HBVDNA进行定量检测。通过实时荧光定量聚合酶链反应PCR测定HBVDNA。进口试剂检测下限是小于20IU/ml，国产试剂在临床应用也比较多，但标准要低于进口试剂。PCR检测方法先进，多种形式，如反转录聚合酶链反应RT-PCR可以对HCVRNA进行定量检测。通过这种方法还可以进一步进行核酸序列的测定，检测病*基因型、以及是否有耐药基因的发生，乙肝病*前C区变异等。

定量检测能够动态反应疾病的自然过程以及对抗病*治疗应答的情况，还可以预测疗效，为是否停药提供依据。受到临床医师的重视，是目前临床应用最多的方法。