正在墨西哥进行HEPDART大会上，研究人员带来了一项基于ARCUS平台开发的PBGENE-HBV基因编辑候选药物临床前完整试验数据。本届HEPDART大会开始及结束时间为年12月5日至9日。
乙肝在研新药PBGENE-HBV，临床前数据，在HEPDART大会发布
一、研究背景
研究人员介绍，乙肝病毒是一个全球主要的健康问题，已有超过2.5亿人存在慢性HBV感染。急性HBV感染后，5%至10%的成年人和高达90%的幼儿，因为无法产生足以清除感染的免疫反应，随后发展成为慢性乙肝（CHB）病毒感染。目前的HBV疗法可以减缓疾病进展，但无法消除共价闭合环状DNA（cccDNA），因此需要环状接受终身治疗。
研究人员假设核酸酶介导的双链断裂可能导致cccDNA降解或产生突变无法复制的cccDNA，这两种结果都可能导致免疫抑制性HBV蛋白、乙肝表面抗原（HBsAg）的减少。在HEPDART大会上，我们描述了一种使用工程ARCUS核酸酶（称为HBV-POL）靶向cccDNA中的HBV聚合酶基因的潜在治愈性治疗方法。
二、研究方法
使用测定的活性和特异性在体外进行核酸酶表征，如确定的分别通过目标编辑百分比和全基因组、无偏寡核苷酸捕获分析。使用HBV感染的原代人肝细胞(PHH)模型，我们能够通过Southern印迹评估cccDNA水平、NGS编辑cccDNA、qPCR检测细胞外HBVDNA和免疫分析(CLIA)检测HBVsAg水平来确定核酸酶的效力。
整合目标序列的编辑是通过分析来自HepG2衍生细胞系的插入缺失和HBsAg减少来进行的，该细胞系包含1个部分HBV基因组的整合并产生HBsAg。为了在体内测试我们的基因编辑方法，研究人员还利用了一个AAV模型，其中游离型AAV作为cccDNA的替代物，并通过含有HBV-POL核酸酶mRNA的脂质纳米粒子(LNP)系统地递送我们的核酸酶。研究人员已经在小鼠中评估了该模型，并将其应用于一种新型的非人类灵长类动物(NHP)模型。
三、研究结果
结果表明，HBV-POL核酸酶经过五轮优化设计，产生了高度特异性和活性的靶向HBV的核酸酶。在转染以表达HBV-POL核酸酶的HBV感染的原代人肝细胞中，实现了cccDNA、分泌的HBVDNA和HBsAg的显著减少。在治疗的小鼠中使用含有LNP的HBV-POL核酸酶mRNA，研究人员检测到AAV拷贝减少了60%，高达86%在剩余的AAV中插入缺失，并且在单次LNP给药后血清HBsAg持续降低96%。
在NHP中，研究人员间隔约6周使用两次LNP，并在每次LNP剂量后观察渐进式编辑，最终实现AAV拷贝减少70%和平均34%插入缺失。然而，尽管使用了免疫抑制方案，HBsAg从循环中清除，阻止其用作NHP中HBV-POL活性的生物标志物。
四、研究结论
综上所述，研究人员给出结论，我们开发了一种使用ARCUS核酸酶HBV-POL的基因编辑方法，该方法对cccDNA中的HBV聚合酶基因具有高靶向活性和特异性，并显示出在HBV感染的PHH中体外编辑和降解cccDNA的能力。此外，在小鼠和NHP中由治疗相关的LNP递送的HBV-POL核酸酶可有效切割和降解游离AAV，用作HBVcccDNA的替代物。总之，这些数据支持用于消除cccDNA和潜在治愈HBV感染的基因编辑方法。
小番健康结语：PBGENE-HBV，是一款由临床阶段生物公司（PrecisionBioSciences）基于ARCUS平台开发的基因编辑在研乙肝新药，在HEPDART大会上，研究人员带了以上关于该候选药物的完整临床前数据。科学家对该候选药物的临床前进展评价，将在继续介绍。