01
乙肝病*流行病学
乙肝病*（HBV）感染是全球肝病的主要原因之一，目前有超过20亿的人感染了乙肝病*。这种疾病在很大程度上是通过接触含有病*的体液传播，包括无保护措施的性接触、输血、受污染针头和注射器的重复使用，分娩期间母婴传播等。大约有3.5亿的人受到慢性感染，并有高风险严重疾病，可能死于肝硬化和原发性肝癌，每年有50万到75万人死于该疾病。乙肝是目前仅次于吸烟导致人群患有癌症的因素，当然通过疫苗接种是可以预防的。02
乙肝病*结构
乙型肝炎病*（HepatitisB，HBV）是引起乙型肝炎（简称乙肝）的病原体，属嗜肝DNA病*科，该科病*包含正嗜肝DNA病*属和禽嗜肝DNA病*属两个属，引起人体感染的是正嗜肝DNA病*属。HBV存在形式包括三种状态：
①大球形颗粒（Dane颗粒）：直径约42nm，为完整的病*颗粒，由包膜和核衣壳组成，包膜含HBsAg、糖蛋白和细胞脂肪，核心颗粒内含核心蛋白（HBcAg）、环状双股HBV-DNA和HBV-DNA多聚酶，是病*的完整形态，有感染性。
②小球形颗粒：直径约22nm，是病*装配过程中过剩的衣壳，由HBsAg形成中空颗粒，不含DNA和DNA多聚酶，不具传染性。
③管型颗粒。小球形颗粒串联聚合而成，成分与小球形颗粒相同。
03
实验室检查
实验室检查主要为：乙肝两对半和乙肝DNA病*载量
Part01
乙肝两对半检测
1.乙肝两对半的临床意义
1）HBsAg（乙肝表面抗原）：乙肝病*的外壳物质，本身没有传染性。HBsAg阳性往往提示有完整的病*颗粒存在。通常在感染病*后2～6个月，血清转氨酶还未上升时便可在血清中测到HBsAg阳性。
2）抗-HBs（乙肝表面抗体，HbsAb）：乙型肝炎病*（HBV）自然感染人恢复期出现的抗体，此时HBsAg往往已自然消失。它的存在提示人对乙肝有了抵抗力，是体内对乙肝病*的免疫和保护性抗体。
3）HBeAg（乙型肝炎e抗原）：产生于病*内部，可分泌到血液中，e抗原阳性提示病*有活动，而且是具有传染性的指标。
4）抗-HBe（乙肝e抗体，HBeAb）：是人体针对e抗原产生的一种蛋白质，阳性结果提示病*的传染性变弱，病情已处于恢复阶段，e抗体阳性在抗原转阴后数月出现。
5）抗-HBc（乙肝核心抗体，HbcAb）：乙肝核心抗体分IgM和lgG两种：抗HBc-IgM阳性提示病*活动，有传染性；抗HBc-IgG阳性提示为以往感染，无传染性，不需抗病*治疗。核心抗体一般在表面抗原出现后3～5周，乙肝症状出现前便会在血清中检查出来。
2.实验室检测乙肝表面抗原原理及检出限
以罗氏cobase、双抗体夹心法为例
罗氏仪器
电化学发光免疫分析（ECLIA）是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体或抗原，以三丙胺（TPA）为电子供体，在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应。在反应过程中，磁性微粒为固相载体包被抗体或抗原，用三联吡啶钌标记抗体或抗原，加入待测样本后形成「磁性微粒-抗体-待测抗原-抗体-三联吡啶钌」复合物，以TPA为缓冲液，复合物吸入流动室。流动室中磁性微粒被电极下的磁铁吸附在电极表面，未结合的物质被缓冲液冲走，同时电极加压，三联吡啶钌和TPA在电极表面进行电子转移，从而产生光信号。Part02
乙肝DNA病*载量检测
HBV-DNA是病*的遗传基因，存在于病*的核心部位，它的阳性和HBeAg阳性意义基本是一致的。因此，目前公认的抗病*治疗是否有效，主要是以HBeAg和HBV-DNA的阴转或定量的明显减少为指标。HBV-DNAPCR检测仪
实验室检测乙肝DNA病*载量原理及检出限
1）检测原理：实时荧光定量PCR（QuantitativeReal-timePCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。
2）临床意义及检出限：HBV-DNA定性和定量检测反映了病*复制情况或水平，主要用于慢性HBV感染的诊断、血清HBV-DNA水平的监测，以及评价抗病*疗效，然而一些国产荧光PCR定量试剂检测灵敏度只能达到-拷贝/ml，难以检测出低病*载量的患者（如湖南圣湘试剂最低检测下限为IU/ml，而罗氏原带试剂最低检测下限为20IU/ml）。
04
乙肝大三阳，为何病*载量结果为阴性？
看到这里大家能够想出原因所在了：
①患者在口服抗乙肝病*药物如核苷（酸）类似物的治疗中，HBV-DNA阴转(并非真正转阴，而是血清中的含量低于试剂盒的检测下限)。
②急性乙型肝炎约95%以上的患者可凭借自身免疫功能清除乙肝病*，由于HBV-DNA在血液中的半衰期短于HBeAg，故HBV-DNA阴转后HBeAg仍可阳性。
③假阳性问题，如美国FDA批准的乙肝病*血清学标志物“五项指标”中的HBeAg，正常临界值为1.0S/CO,而3.0S/CO的阳性结果中，就存在假阳性，应引起注意。
此外可能还有其他原因，欢迎大家积极留言参与讨论。。。。。。
参考文献：
[1]彭萍,何力志,彭鑫,张裕,焦芳艳.3个不同国产乙肝病*DNA实时荧光定量PCR检测试剂盒检测结果的比较[J].质量安全与检验检测,,30(06):54-56+60.
[2]ShaoJuanWang,ZiMinChen,MinWei,etal.SpecificdeterminationofhepatitisBeantigenbyantibodiestargetingprecoreuniqueepitopefacilitatesclinicaldiagnosisanddrugevaluationagainsthepatitisBvirusinfection.,10(1):37-50.
[3]ChangTeSheng,YangYaoHsu,ChenWeiMing,etal.Long-termriskofprimarylivercancersinentecavirversustenofovirtreatmentforchronichepatitisB.,11(1)
[4]刘勇.乙肝病*感染检测研究进展[J].中国医疗器械信息,,26(06):26+29.
供稿：宋国滨
编辑：钟霓
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